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多肽类药物的制备及分析手段

2024-03-13

多肽通常是指少于100 个氨基酸通过肽键连接而成的化合物,其相对分子质量低于10000。多肽类药物在治疗肿瘤、糖尿病、心血管疾病、骨质疏松症、胃肠道疾病、中枢神经系统疾病、免疫疾病等方面具有显著的疗效。相较于化学药物,多肽类药物具有更高的生物活性,特异性强且毒性反应相对较弱,与体内受体的亲和性较好。

因为多肽在机体内扮演的角色多种多样,参与众多生理功能,因此多肽药物的发展前景十分广阔。多肽药物具有显著的活性、强特异性、良好的受体的亲和性、较低的毒性、不易在体内蓄积,并且免疫原性弱于一些蛋白药物,甚至更小的多肽分子可能无免疫原性。此外多肽药物在结构上容易改造、生产上也相对容易,甚至可以用合成途径来解决生产问题。

多肽的制备方法主要有天然提取,化学合成,基因工程和生物重组法等,对于结构相对简单的多肽,化学合成是做常用的制备方法,也是多肽药物的主要制备方式。氨基酸保护剂和保护氨基酸是合成多肽类药物的主要中间体产品。筑药网提供一系列的氨基酸中间体产品如CAS: 55456-40-1、CAS: 1113-49-1、CAS: 557768-95-3、CAS: 17186-53-7、CAS: 169566-77-2等产品,以助力多肽药物的合成研究。

氨基酸中间体

关于多肽药物的分析手段,首选是LC-MS还是ELISA?常常有人认为,在分子量较小的情况下,LC-MS在大分子生物分析中是具有优势的。然后由于LC-MS涉及到残留、保留、回收率以及复杂的样品前处理等问题,对于分子量较大的多肽、蛋白质和抗体等大分子,建议采用ELISA分析方法。

多肽类药物存在一些弊端,例如半衰期短,会被机体快速消除,为了达到有效浓度可能需要频繁给药,成本较高且给患者造成较大的生活负担;稳定性差,容易被酶解,甚至对酸、碱、高温或有机溶剂等敏感而容易失活等。那么在进行多肽药物研发时,我们如何处理不稳定的多肽以增强其稳定性并便于其分析呢?

多肽药物分析

1、提前进行采样条件和保存条件的评估,采样的时候合适的抗凝剂的选择也非常重要。

(1)对于含有肝素结合因子来源肽的采样,不宜使用肝素。

(2)加入EDTA可以帮助抑制金属蛋白酶的活性,提高生物样品的稳定性。

2、面对容易酶解的供试品,我们应该如何处理呢?

我们可以添加特异性的酶抑制剂或者采用鸡尾酒式的酶抑制剂,在现实当中我们还要注意鸡尾酒溶酶问题,因为有的溶酶它是容易造成溶血的。对胰岛素一类的药物一定要注意防止溶血的现象产生。 对于GLP-1类物质,应考虑添加DPP-IVF抑制剂以防止降解。因此,了解被分析物的性质至关重要。对于稳定性的影响一些特殊的样品管在实践当中也可以用起来,他们也能起到一些有效的保护作用。

目前就有很多好的商业化采取管可供选择,例如P800(管子)、P700(管子),它里面都添加有一些特定的蛋白酶抑制剂,特别是可以用于GLP-1、GIP这样的样品采集,经过我们实际测试,对胰岛素、血糖、多肽等物质具有很好的稳定效果。

3、面对热敏感、PH敏感或不稳定条件下的分析,我们应该如何应对呢?

所有的分析试剂要需要定期进行pH值复检,复杂试剂需要现备现用。实验室的恒温恒湿条件是很重要的,如果条件允许,可以购置高端的恒温恒室的孵箱,在其中进行培育和生物分析反应。

4、如何克服蛋白质聚集和吸附问题?

如表面活性剂吐温20可以有效预防药物和管壁的吸附,储存液和工作液的配方也需要注意。优良的配方在生物分析当中是相当重要的,它有助于防止蛋白相互作用导致的聚集,可以使用优质玻璃管去配置,避免这些样品吸附的问题。如果遇到难以解决的问题,则应该现配现用。

当然,必要时可以综合运用以上几种方法。

筑药网(Pharmalego)是一家位于上海的提供医药中间体销售和定制合成服务的公司,我们的医药中间体产品品种齐全,产品质量高,提供高纯度的苯环中间体、杂环中间体、吡啶中间体、氘代中间体、嘧啶中间体等产品,满足医药研发和科研工作中的化合物筛选及药物合成需要;同时我们也提供大包装医药中间体产品供应以及高级医药中间体定制合成服务,为客户提供具有市场竞争力和高性价比的产品和解决方案。

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